1.粗蛋白的測(cè)定原理：

凱氏法測(cè)定試樣中的含N量，即在催化劑作用下，用H2SO4破壞有機(jī)物，使含N物轉(zhuǎn)化成（NH4）2SO4，加入強(qiáng)堿進(jìn)行蒸餾使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，測(cè)出N含量，將結(jié)果乘以換算系數(shù)6.25，計(jì)算出CP含量。

2.粗蛋白的測(cè)定材料與器具：

粗蛋白的測(cè)定需要使用到的儀器有：H2SO4、混合催化劑、NaOH、硼酸、混合指示劑、HCl標(biāo)準(zhǔn)液、蔗糖、硫酸銨、硼酸吸收液

粗蛋白的測(cè)定儀器設(shè)備：粉碎機(jī)、分樣篩、分析天平、蛋白質(zhì)測(cè)定儀、滴定管、全自動(dòng)定氮儀、錐形瓶、容量瓶、消煮管

3.粗蛋白的測(cè)定方法步驟

1、試樣的消煮，稱取試樣0.5g，準(zhǔn)確至0.0202g，放入消煮管中加入6.4g混合催化劑與試樣混合均勻，再加入12ml H2SO4將消煮瓶置于電爐上加熱，開(kāi)始小火，待樣品焦化、泡沫消失后，再加強(qiáng)火力（360-410℃）直至透明的藍(lán)綠色，然后再繼續(xù)加熱至少2h。

2、NH3的蒸餾

將試樣消煮液冷卻，加入20ml蒸餾水，轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，冷卻后用水稀釋至刻度，搖勻，作為試樣分解液。將半微量蒸餾裝置的冷凝管末端浸入裝有20ml硼酸吸收液和2滴混合指示劑的錐形瓶?jī)?nèi)。蒸汽發(fā)生器的水中應(yīng)加入甲基紅指示劑數(shù)滴，硫酸數(shù)滴，在蒸餾過(guò)程中保持此液為橙紅色，否則需補(bǔ)加硫酸。準(zhǔn)確移取試樣分解液10-20ml注入蒸餾裝置的反應(yīng)室中，用少量蒸餾水沖洗進(jìn)樣入口，塞好入口玻璃塞，再加入10ml氫氧化鈉溶液，小心提起玻璃塞使之流入反應(yīng)室，將玻璃塞塞好，且在入口處加水密封，防止漏氣。蒸餾4min降下錐形瓶使冷凝管末端離開(kāi)吸收液面，再蒸餾1min,用蒸餾水沖洗冷凝管末端，洗液均需流入錐形瓶?jī)?nèi)，然后停止蒸餾。

3、滴定

蒸餾后的吸收液用HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛壹t色為終點(diǎn)。

4、空白測(cè)定

稱取蔗糖0.5g代替試樣進(jìn)行空白測(cè)定

5、計(jì)算

V2：滴定試樣時(shí)所需標(biāo)準(zhǔn)溶液體積ml

V1：滴定空白時(shí)，所需標(biāo)準(zhǔn)溶液體積ml

C：鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度mol/l

M：試樣質(zhì)量 g

0.0140：與1mol HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)?shù)囊詆表示的N的質(zhì)量。

6.25：N換算成CP的平均系數(shù)。

6、重復(fù)性

每個(gè)試樣的平行樣進(jìn)行測(cè)定，以其算術(shù)平均什為結(jié)果。

當(dāng)粗蛋白質(zhì)在25%以上時(shí)，允許相對(duì)偏差為1%；

當(dāng)粗蛋白質(zhì)在10%~25%之間時(shí)，允許相對(duì)偏差為2%；

當(dāng)粗蛋白質(zhì)在10%以下時(shí)，允許相對(duì)偏差為3%。

       飼料是家畜成長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，飼料中蛋白質(zhì)含量的高低，直接決定了家畜的質(zhì)量高低。因此，飼料中蛋白質(zhì)的含量測(cè)定是一個(gè)很重要的步驟。而蛋白質(zhì)存在于一切動(dòng)植物體中，是一切生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。家畜從飼料中攝取蛋白質(zhì)及其分解產(chǎn)物，以組成自身的蛋白質(zhì)，因此，飼料中蛋白質(zhì)含量的分析就成為評(píng)價(jià)飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的主要指標(biāo)。